蛋白质如何清洗
发表时间:2024-07-22 13:01:15
来源:网友投稿
蛋白质在空气中会氧化变性凝固,加酶洗衣粉中的酶就是专门洗涤分解蛋白质的生物催化剂。一般人使用加酶洗衣粉都没有充分发挥酶的作用,重要的是洗涤方法不对:酶的分解需要合适的温度和时间,要求45℃下保温浸泡40-60分钟。然后常规洗涤就能将汗渍、血迹、奶渍、鸡蛋清渍等蛋白质污渍洗涤干净① 盐析法一般来说所有固体溶质都可以在溶液中加入中性盐而沉淀析出,这一过程叫盐析.在生化制备中,许多物质都可以用盐析法进行沉淀分离,如蛋白质、多肽、多糖、核酸等,其中以蛋白质沉淀最为常见,特别是在粗提阶段.盐析法分为两类,第一类叫Ks分段盐析法,在一定PH和温度下通过改变离子强度实现,用于早期的粗提液;第二种叫b分段盐析法,在一定离子强度下通过改变PH和温度来实现,用于后期进一步分离纯化和结晶.② 有机溶剂沉淀法 有机溶剂的沉淀机理是降低水的介电常数,导致具有表面水层的生物大分子脱水,相互聚集,最后析出.该法优点在于:
1)分辨能力比盐析法高,即蛋白质或其它溶剂只在一个比较窄的有机溶剂浓度下沉淀;
2、)沉淀不用脱盐,过滤较为容易;
3、)在生化制备中应用比盐析法广泛.其缺点是对具有生物活性的大分子容易引起变性失活,操作要求在低温下进行.总体来说蛋白质和酶的有机溶剂沉淀法不如盐析法普遍
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