高中生物选修三
首先要明白这里的标记基因针对的是基因工程操作,如果需要克隆一个基因,需要把这个基因重组到载体中去,进一步把重组载体送到受体细胞中。
但是这个基因不一定是纯的,可能和其他的DNA片段混合在一起,发生重组的载体就可能有两类,一类是重组了目的基因的,一类是重组了非目的基因的。当然还有未发生重组的空载体。
进而发生转化(载体进入受体细胞)是可能有三种情况:一是未重组的载体进入受体细胞;二是重组目的基因的载体进入受体细胞;三是重组非目的基因的载体进入受体细胞。
那么就有两个问题要解决:一是如何判断重组载体进入受体细胞了;二是如何判断重组有目的DNA的载体进入受体细胞。
标记基因因为存在于载体上,可以作为受体细胞接受外来载体的标志(不论是何种载体);如果重组载体与DNA重组的位置在另一标记基因内部,则可能导致该标记基因失活。那么两个遗传标记都存在的就是空载体发生转化,只有一个遗传标记的是重组载体发生转化。
但是如何判断重组有目的DNA的载体进入受体细胞?
可以采用分子杂交的方法,实质就是用目的基因的序列(探针)去跟未知的受体细胞中的DNA杂交,如果能够杂交,说明该受体细胞中含有和探针序列相同的DNA(就是重组有目的基因的载体)。而这种杂交一般发生在固体支持介质上(比如琼脂糖凝胶或者硝酸纤维膜等),杂交信号表现的是一个条带,称之为杂交带。
总结起来就是遗传标记能筛选出接受重组载体的受体细胞;DNA分子杂交技术检测接受重组有目的基因载体的受体细胞。
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