的方法可以研究某种化学物质是否能够使染色体畸变

通过动物细胞培养的方法可以研究某种化学物质是否能够使染色体畸变，请你完成下列实验并回答有关问题．

实验原理：有毒物质能诱导染色体畸变，根据发生染色体畸变细胞的数量（或占全部培养细胞的百分数），可判断该化学物质的致畸性的强弱．

材料、药品、用具：

活的小白鼠胚胎某种化学物质、某种酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、生理盐水、灭菌设备、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜．等等．

实验步骤：

（1）制备细胞悬浮液

把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入___酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液．

（2）进行细胞培养

①取A、B二个洁净的培养瓶，___．

②向A培养瓶中加入适量的该化学物质并将培养瓶摇匀；向B瓶中加入___．在动物细胞培养过程中，由于动物细胞在培养瓶中贴壁生长具有___现象，所以细胞停止分裂增殖时，培养瓶壁上形成的细胞层数是___．

（3）制作临时装片

①细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出二个培养瓶，再次将瓶内动物细胞处理成细胞悬浮液，加入动物细胞固定液以便迅速杀死并固定细胞．

②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，___3～5min后，盖上盖玻片．

（4）镜检和统计

把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于___期的细胞，并与B组观察结果作对比．

预期结果及相应的结论（与B组相比较）

如果___，则说明这种化学物质致畸性很强；

如果___，则说明这种化学物质致畸性较弱；

如果___，则说明这种化学物质没有致畸性．

（1）把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液．

（2）①取A、B二个洁净的培养瓶，（消毒灭菌，）加入等量的细胞悬浮液．

②向A培养瓶中加入适量的该化学物质并将培养瓶摇匀；向B瓶中加入等量生理盐水．在动物细胞培养过程中，由于动物细胞在培养瓶中贴壁生长具有接触抑制现象，所以细胞停止分裂增殖时，培养瓶壁上形成的细胞层数是单层（或一层）．

（3）②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，用适宜浓度龙胆紫溶液染色3～5min后，盖上盖玻片．

（4）把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于细胞有丝分裂中期的细胞，并与B组观察结果作对比．

预期结果及相应的结论：

如果染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）很多，则说明这种化学物质致畸性很强；

如果染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）较少，则说明这种化学物质致畸性较弱；

如果染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）几乎没有，则说明这种化学物质没有致畸性．

故答案为：

（1）胰蛋白

（2）①（消毒灭菌，）加入等量的细胞悬浮液

②等量生理盐水接触抑制单层（或一层）

（3）②用适宜浓度龙胆紫溶液染色

（4）细胞有丝分裂中

预期结果及相应的结论：

染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）很多

染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）较少

染色体畸变的细胞数量（或占全部培养细胞的百分数）几乎没有