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无酶的EP管还需不需要消毒

发表时间:2024-07-12 02:07:40 来源:网友投稿

金属、陶瓷器皿:200℃干热灭菌过夜.

枪头等经DEPC水浸泡后灭菌.

详细版本:

1、所有的组织中均存在RNA酶,人的皮肤、手指、试剂、容器等均可能被污染,因此全部实验过程中均需戴手套操作并经常更换(使用一次性手套).

2、所用的玻璃或瓷器(如研钵)器皿需置于干燥烘箱中200℃烘烤2小时以上.凡是不能用高温烘烤的材料如塑料容器等皆可用0.1%的焦碳酸二乙酯(DEPC)水溶液处理,再用蒸馏水冲净.DEPC是RNA酶的化学修饰剂,它和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环反应而抑制酶活性.DEPC与氨水溶液混合会产生致癌物,因而使用时需小心.

3、试验所用试剂也可用DEPC处理,加入DEPC至0.1%浓度,然后剧烈振荡10分钟,再煮沸15分钟或高压灭菌以消除残存的DEPC,否则DEPC也能和腺嘌呤作用而破坏mRNA活性.

注意:DEPC能与胺和巯基反应,因而含Tris和DTT的试剂不能用DEPC处理.Tris溶液可用DEPC处理的水配制然后高压灭菌.

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