阿魏酸的测定方法

方法名称：急支糖浆—阿魏酸的测定—高效液相色谱法应用范围：该方法采用高效液相色谱法测定急支糖浆中阿魏酸的含量。该方法适用于中药制剂急支糖浆。方法原理：供试品水浴蒸至近干，加甲醇进行热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，以稀盐酸调pH1~2,煮沸，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚提取，乙醚提取液再用2%碳酸钠提取，碳酸钠提取液用乙酸乙酯洗涤，弃去洗涤液，碱液用稀盐酸调pH1~2,用乙醚提取，乙醚提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，过滤，滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长323nm处检测阿魏酸的吸收值，计算出其含量。试剂：1.甲醇（色谱纯）2.乙酸3.乙醚4.碳酸钠5.盐酸仪器设备：1.仪器1.1高效液相色谱仪1.2色谱柱Shim-PackCLC-ODS分析柱(150×4.6mm,5μm)，理论板数按阿魏酸峰计算为4000。1.3紫外吸收检测器2.色谱条件2.1流动相：甲醇1%乙酸水=28722.2检测波长：323nm2.3柱温：室温试样制备：1.称取供试品精密吸取该品25mL。2.对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品30mg,置50mL量瓶中，加甲醇溶解，并加至刻度，混匀。精密吸收5mL置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，得对照品溶液。3.供试品溶液的制备供试品水浴蒸至近干，加甲醇加热回流提取2次，每次50mL,回流30min,滤过，滤液蒸干，残渣加水40mL溶解，以稀盐酸调pH1~2,煮沸，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚20,10,10,10,10mL提取4次，合并乙醚液，用2%碳酸钠20,10,10,10mL提取4次，合并提取液，用乙酸乙酯25mL洗涤，弃去洗涤液，碱液用稀盐酸调pH1~2,以乙醚20,10,10,10mL提取4次，合并乙醚液,40~45℃蒸干，残渣精密加甲醇2mL溶解，作为供试品溶液。注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。操作步骤：1.标准曲线绘制精密吸取上述对照品溶液4,8,12,16,20μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长323nm处测定阿魏酸的吸收值，以进样量对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。2.供试品的测定精密吸取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长323nm处测定阿魏酸的吸收值，计算出其含量。