DNA连接酶与聚合酶有什么区别呢
1、形成方式不同
DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。
DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的DNA片段上,形成磷酸二酯键。dna聚合酶起到催化剂的作用,催化原来的dna进行复制,然后将原来的dna和复制以后的dna进行模板配对后,连接聚合在一起,就可以形成新的dna链。
2、模板不同
DNA连接酶不需要模板,因为DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。用DNA连接酶连接具互补粘性末端的DNA片段或是用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来。
DNA聚合酶是以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链。DNA聚合酶的结构是三磷酸腺苷。
3、用途不同
DNA连接酶主要用于基因工程,将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合,故也称“基因针线”。如基因工程中,大肠杆菌连接酶连接黏性末端,T4连接酶既可连接黏性末端,又可连接平末端。
DNA聚合酶在DNA复制中起做用,主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
DNA聚合酶用于DNA复制,连接两条DNA单链行成一条DNA双链,作用于碱基对间的氢键。DNA连接酶用于基因工程,将目的基因连在载体(一般为质粒)上,作用于两脱氧核糖核苷酸间的磷酸二脂键。DNA聚合酶,又称DNA依赖的DNA聚合酶,它是以亲代DNA为模板,催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一类酶。DNA连接酶分为两大类:一类是利用ATP的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖ATP的DNA连接酶,另一类是利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖NAD*的DNA连接酶。
DNA连接酶 连接酶旧称“合成酶”DNA ligaseDNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的.它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键.但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键.
一般性质:大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链.对胰蛋白酶敏感,可被其水解.水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物,但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形
成.DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子,和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近,这也是比较合理的现象.因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合,填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口.这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用,连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组.
噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链,分子量为60KD,其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制.此酶的催化过程需要ATP辅助.T4DNA连接酶可连接DNA-DNA,DNA-RNA,RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端.另外NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率,而对T4DNA连接酶则无效.无论是T4DNA连接酶,还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接.
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