细胞周期同步化的方法与原理
发表时间:2024-07-28 07:01:44
来源:网友投稿
方法:
1.DNA合成阻断法
DNA合成阻断法:这种方法是选用无毒或低毒的DNA合成抑制剂,特异和可逆地抑制DNA合成,而不影响处于其他时期细胞的运转,最终可将细胞群阻断在S期或G1/S交界处。
5-氟脱氧尿嘧啶、羟基脲、阿糖胞苷、氨甲蝶呤以及高浓度AdR(脱氧核糖腺苷)、GdR(脱氧核糖鸟苷)和TdR(脱氧核糖胸苷)等均可以通过抑制DNA合成使细胞同步化。其中高浓度TdR对S期细胞的毒性较小,所以实验中常用TdR阻断法诱导细胞同步化。
2.分裂中期阻断法
某些药物如秋水仙素、秋水酰胺和诺考达唑等,可以抑制微管聚合,因而能有效地抑制细胞纺锤体的形成,将细胞阻断在细胞分裂中期[染色体着丝点是否着生纺锤丝是中期向后期发展的重要检验,而细胞的其他变化不受此影响,比如核膜核仁已完成解体消失,染色质已高度螺旋化成为染色体等等,这都是中期的重要特点]。处于间期的细胞,受药物的影响相对较弱,常可以继续运转到M期。将分裂中期细胞悬浮于新鲜培养液中继续培养,它们可以继续分裂并沿细胞周期同步运转,从而获得G1期不同阶段的细胞。
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