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柱层析干法上样步骤

发表时间:2024-07-29 12:10:53 来源:网友投稿

装柱方法分为湿法和干法,一般来说湿法装柱的效果优于干法装柱。

湿法装柱: 先将柱层析的填料活化处理后浸润在适宜的有机溶剂中,使之处于有机环境。

装柱时在层析柱自下而上依次填入硅烷花玻璃棉→石英砂→已处理好的层析填料,一边装柱一边用洗耳球轻轻敲打,使填料紧实,然后打开旋塞放掉多余的有机溶剂即可进行样品分析。

干法装柱: 现在层析柱内填入硅烷花玻璃棉,然后用不同极性的有机溶剂对层析柱的内壁进行充分润洗,待层析柱晾干,依次填入石英砂及各种层析填料,同样,一边装柱一边用洗耳球轻轻敲打,使填料紧实,然后加入一定量的有机溶剂淋洗填好的柱子,一般这个体积为柱子死体积的2倍。然后打开旋塞使淋洗液流出,即可进行样品分析。

填料紧实是保证层析柱柱效的关键,一定要注意。 层析柱最下层的棉花,我们一般是用硅烷花玻璃棉的,在马弗炉中活化即可用。

如果用脱脂棉,需要用二氯甲烷抽提3遍以去除杂质,以防干扰实验。

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