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qpcr模板为啥要稀释

发表时间:2024-07-29 22:44:15 来源:网友投稿

qPCR模板一般是由DNA样本或cDNA构成的,因为其可能会影响qPCR的准确性和灵敏度,需适当稀释。主要有以下原因:

1. 避免抑制效应:qPCR反应中的模板过多,可能会导致硫酸铵和双链DNA结合,从而降低PCR反应的效率。而在过度稀释后,模板的影响会被最小化,从而避免此种效应。

2. 稀释限制:模板过多时,会导致LEP的积累,从而使反应效率降低。适当稀释可缓解这种积累现象,保证PCR反应的质量。

3. 精度控制:通过适当稀释DNA模板,可以控制反应的准确性,最大限度地减少样本批次间的误差。

4. 稀释优化:适量稀释后,能够优化qPCR反应条件,提高样品检测的敏感度和精度,同时降低非特异性产物的产生。

总之对qPCR模板适当进行稀释是保证PCR反应准确性和灵敏度的重要措施。。

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