当前位置：新励学网 > 秒知问答 > 荧光pcr技术的基本原理和过程

荧光pcr技术的基本原理和过程

发表时间：2024-07-30 04:01:31 来源：网友投稿

基本原理:

荧光PCR技术，是指在普通PCR技术的基础上，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

主要有两种方法及过程：

1、SYBR Green 染料法

SYBR能够结合到双链DNA上面，当系统中的模板被扩增时，SYBR能够有用结合到新组成的双链上面，跟着PCR的进行，结合的SYBR燃料越来越多，被仪器检测到的荧光信号越来越强，然后到达定量的意图。在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

2、TaqMan探针法：

PCR扩增时在参加一对引物的一起参加一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两头分别标记一个陈述荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时陈述基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA恣意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使陈述荧光基团和淬灭荧光基团别离，然后荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，完成了荧光信号的累积与PCR产品形成彻底同步。

免责声明：本站发布的教育资讯（图片、视频和文字）以本站原创、转载和分享为主，文章观点不代表本网站立场。

如果本文侵犯了您的权益，请联系底部站长邮箱进行举报反馈，一经查实，我们将在第一时间处理，感谢您对本站的关注！