cck8增值率怎么算
发表时间：2024-07-31 12:31:22
来源：网友投稿
细胞增殖的方法：BrdU标记法1、细胞以1.5×105/ml细胞数接种于直径35ml培养皿中（内放置一盖玻片），培养1天，用含0.4％FCS培养液同步化3天，使绝大多数细胞处于G0期。
2、终止细胞培养前，加入BrdU（终浓度为30μg/L）；37℃，孵育40min。
3、弃培养液，玻片用PBS洗涤3次。
4、甲醇/醋酸固定10min。
5、经固定的玻片空气干燥，0.3％H2O2-甲醇30min灭活内源性氧化酶。
6、5％正常兔血清封闭。
7、甲酰胺100℃；5min变性核酸。
8、冰浴冷却后PBS洗涤，加1抗即抗小鼠BrdU单抗（工作浓度1：50），阴性对照加PBS或血清。
9、按ABC法进行检测，苏木素或伊红衬染，在显微镜下随机计数10个高倍视野中细胞总数及BrdU阳性细胞数，计算标记指数
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