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双缩脲试剂怎么配

发表时间：2024-08-01 09:32:59 来源：网友投稿

双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。

它是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。会遇到蛋白质显紫色。双缩脲试剂本是用来检测双缩脲，由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，所以也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，所以它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾，会延长试剂的使用寿命。酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。需要注意的是，能与双缩脲试剂发生紫色反应的化合物分子中至少含有两个肽键。所以二肽无法用它来检验。

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