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DNA的人工化学合成所用的底物是什么

发表时间：2024-08-01 13:28:35 来源：网友投稿

末端终止法测DNA序列即SANGER双脱氧链终止法,其原理是:DNA链中核苷酸以3’；5’-磷酸二酯键连接，合成DNA所用的底物是 2’-脱氧核苷三磷酸。

2’；3’ddNTP与普通dNTP不同，它们在脱氧核糖的3’位置缺少一个羟基。在DNA聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中，但由于没有3’羟基，不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键，所以正在延伸的DNA链不能继续延伸。在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP，链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争。产物是一系列的核苷酸链，其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离。在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP，结果将产生4组寡核苷酸，它们将分别终止于模板链的A、C、G或T位置。

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